Что такое пгт при эко
Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ) – что это такое?
В программе ЭКО пациентам может быть рекомендовано проведение преимплантационного генетического тестирования эмбрионов.
Зачем нужно это исследование и каковы показания к его проведению?
ПГТ включает в себя все виды исследований генетического материала эмбрионов на ранних стадиях развития. ПГТ проводится до переноса эмбрионов в матку, то есть до наступления беременности. ПГТ позволяет выявить генетические аномалии эмбрионов, которые невозможно выявить при визуальном отборе, и выбрать самый качественный для переноса. Генетические исследования эмбрионов применяются в программах ЭКО с 1992 года.
Важно знать: преимплантационное генетическое тестирование безопасно для эмбрионов.
ПГТ проводится на том этапе развития, когда клетки эмбриона еще не дифференцированы. Поэтому биопсия (забор образца ткани) не наносит эмбриону вреда. При дальнейшем развитии удаленные клетки замещаются новыми, и развитие эмбриона идет без нарушений.
Что можно «увидеть» с помощью ПГТ?
Показания к преимплантационному генетическому тестированию
Генетическая диагностика в настоящее время не входит в перечень обязательных медицинских обследований в программе ЭКО. ПГТ проводится с согласия пациентов и рекомендовано в следующих случаях:
Методы проведения ПГТ
В зависимости от цели исследования в современном мире применяются следующие технологии:
Хромосомный анализ aCGH (метод сравнительной геномной гибридизации на микрочипах) по технологии GenetiSure. Включает анализ всех 46 хромосом (22 пары аутосомных хромосом и пара половых хромосом – X и Y). Точность данного метода более 98%.
Высокопроизводительное секвенирование (NGS). Высокоточный метод, позволяющий исследовать сразу все 23 пары хромосом. Точность данного метода составляет до 99%.
Рекомендации по выбору метода ПГТ дает врач генетик на основании результатов обследований и консультации будущих родителей.
Преимплантационное диагностическое тестирование можно проводить как в свежем цикле ЭКО, так и в криопротоколе. Во втором случае возможности для диагностики шире, поскольку не ограничено время исследований.
ПГТ дает возможность узнать пол будущего малыша. Но переносить эмбрион определенного пола Согласно законодательству РФ, можно только при наличии показаний (высокий риск передачи наследственных патологий, сцепленных с полом).
В чем разница между ПГТ-А и ПГТ-М
Преимплантационное генетическое тестирование позволяет выявить различные хромосомные аномалии эмбриона. Такая диагностика является одним из наиболее важных этапов в рамках современных репродуктивных технологий. ПГТ позволяет в значительной степени повысить шансы на успех при проведении ЭКО. Эта процедура доступна в нашем центре планирования семьи и репродукции в Краснодаре.
Что такое ПГТ-А и для чего оно нужно
ПГТ-А является биопсией клеток бластоцисты. Она дает возможность выбрать наиболее жизнеспособный эмбрион, без отклонений на генетическом уровне. Наиболее частой причиной неудач при проведении экстракорпорального оплодотворения становятся хромосомные аномалии. Чем старше будущие родители, тем актуальнее для них становится ПГТ-А в рамках планирования беременности. Проведение данной генетической диагностики не оказывает негативного влияния на эмбрион и его дальнейшее развитие. Среди основных показаний к проведению ПГТ-А стоит отметить неудачные попытки экстракорпорального оплодотворения в прошлом, самопроизвольные выкидыши и патологии сперматогенеза.
Процедура осуществляется на 3-5 день развития эмбриона. В рамках ПГТ-А достаточно получить несколько клеток трофэктодермы исследуемого эмбриона. Во время проведения данной процедуры эмбрион продолжает храниться в медицинском центре в криобанке. Образец тканей передается в лабораторию. Транспортировка производится в условиях строжайшего соблюдения температурного режима. После проведения исследования эмбриолог составляет заключение относительно того, может ли эмбрион использоваться для экстракорпорального оплодотворения.
Неоспоримым преимуществом ПГТ-А является возможность заранее узнать пол будущего малыша. Этот фактор имеет значение, потому что некоторые генетические заболевания передаются только детям определенного пола. Однако, выбор пола запрещен законодательством РФ без наличия медицинских показаний.
Кроме того, в некоторых ситуациях первостепенную важность имеет информация о резус-факторе будущего ребенка. Это дает возможность избежать резус-конфликта. Ситуация, когда у матери и ребенка разные резус-факторы, может стать причиной осложнений в период беременности.
Если же в семье есть ребенок, которому в силу состояния здоровья необходима трансплантация костного мозга, ПГТ-А позволяет обеспечить совместимость тканей между детьми.
Использование результатов данной процедуры позволяет в значительной степени уменьшить вероятность прерывания беременности на раннем сроке. Ведь причиной выкидыша в 1-ом триместре в большинстве случаев становятся серьезные генетические патологии у эмбриона. В конечном же итоге это исследование позволяет сократить количество попыток ЭКО.
Основные нюансы ПГТ-М
Помимо ПГТ-А, в рамках преимплантационного генетического тестирования проводится диагностика моногенных болезней и выявление отдельных генных аллелей. ПГТ-М позволяет выявить муковисцидоз, гемофилию, амиотрофию, фенилкетонурию и другие опасные врожденные заболевания.
Бесплодие не является главной причиной для проведения подобной процедуры. Данная разновидность преимплантационного генетического тестирования актуальна для супружеских пар, у которых были выявлены те или иные врожденные заболевания. По сравнению с ПГТ-А, ПГТ-М пока проводится гораздо реже. Однако исследования врожденных патологий крайне важны при планировании беременности. Ведь этот вид диагностики позволяет производить перенос здоровых эмбрионов.
Во время исследования эмбриолог делает специальные тесты и выявляет яйцеклетки пригодные для использования в протоколе экстракорпорального оплодотворения. Диагностика моногенных генетических заболеваний (ПГТ-М) нейтрализует вероятность контаминации ДНК матери и малыша. Вероятность постановки неверного диагноза после проведения преимплантационного генетического тестирования минимальна.
ПГТ-А является обязательным этапом подготовки к процедуре экстракорпорального оплодотворения. Однако существует техническая возможность одновременного проведения ПГТ-А и ПГТ-М. Приняв подобное решение на этапе планирования беременности, можно исключить вероятность появления у потомства хромосомных аномалий.
Преимплантационная генетическая диагностика эмбриона
До последнего времени единственным способом предотвратить рождение больного ребенка было прерывание беременности после того, как в результате диагностических процедур (пренатальная диагностика) получали подтверждение генетической патологии у плода. В случае преимплантационного генетического тестирования есть возможность отобрать эмбрионы без генетических аномалий еще до стадии переноса.
Как правило, у одной женщины получают несколько яйцеклеток, и почти всегда есть возможность выбрать хотя бы одну здоровую, которая даст жизнь здоровому ребенку. Полученные яйцеклетки сначала оплодотворяют, затем делают биопсию эмбрионов, отбирают с помощью генетического анализа здоровые эмбрионы и переносят их в матку женщины. Болезни, которые ребенок может получить от отца, можно определить только путем биопсии эмбриона.
Преимплантационная диагностика является единственной альтернативой методам пренатальной диагностики.
Типы ПГТ (Преимплантационная генетическая диагностика)
ПГТ разделяют на несколько типов по целевому направлению диагностики.
ПГТ-А – анализ анеуплоидий, направлен на выбор эмбриона с нормальным количеством хромосом. Чаще всего данный подход применяется для увеличения шансов на имплантацию при переносе. Он позволяет быстрее получить желаемую беременность (повышает шансы до 70-75%) и позволяет избежать переноса анеуплоидных эмбрионов, например, с синдромом Дауна.
ПГТ-М – тестирование на конкретную мутацию, выявленную у родственников. Это возможность исключения моногенных (обусловленных одним геном) заболеваний у переносимых эмбрионов. Необходима дополнительная предварительная диагностика родителей для уточнения, в каком именно участке гена могла произойти мутация. Стоит отметить, что диагностика проводится только на конкретную мутацию и гарантирует ее отсутствие в переносимом эмбрионе, но совершенно ничего не говорит об отсутствии других нарушений в его геноме.
ПГТ – SR – тестирование эмбрионов на наличие специфических перестроек в их ДНК, которые так же могут приводить к различным заболеваниям и передаваться по наследству.
Наши врачи
Показания к ПГД (ПГТ)
Какие болезни выявляет ПГТ-М? Уже сегодня возможна «выбраковка» до беременности эмбрионов с такими наследственными заболеваниями, как муковисцидоз, гемофилия А, болезнь Тей-Сакса, дефицит 1-антитрипсина, миатрофия Дюшена и др. (см. список).
Список некоторых наиболее распространенных наследственных заболеваний:
Наши преимущества
ребенка родилось благодаря нашим специалистам
Как правило, у одной женщины получают несколько яйцеклеток, и почти всегда есть возможность выбрать хотя бы одну лучшую, которая даст жизнь здоровому ребенку. Полученные яйцеклетки сначала оплодотворяют, затем эмбрионы культивируют и на 5-6-й день делают биопсию трофэктодермы – клеток, которые участвуют в формировании плаценты.
Такой подход меньше всего сказывается на жизнеспособности эмбрионов и, в отличие от биопсии на 3-й день, наименее травматичен. Полученные клетки под микроскопом помещают в специальные пробирки и передают в генетическую лабораторию. Среди всех биоптатов, отбирают с помощью генетического анализа те эмбрионы, что не несут патологии и именно их переносят в матку женщины.
Что дальше? ПГТ методом NGS
Секвенирование нового поколения – NGS (Next Generation Sequencing) – это метод определения последовательности нуклеотидов в ДНК.
Технология позволяет проводить анализ последовательности ДНК одновременно в большом количестве участков хромосомы, что дает возможность значительного ускорения всего процесса и снижает себестоимость. Для определения последовательности нуклеотидов (структур ДНК) необходимо создать копию исследуемой ДНК.
Существует несколько путей определения последовательности нуклеотидов в интересующей нас ДНК при помощи NGS. Эту последовательность можно определить с помощью измерения кислотности среды (ph) при удлинении копируемой цепочки; второй путь заключается в использовании «меченых» нуклеотидов: их считывает светочувствительная матрица, а компьютер обрабатывает информацию и строит цепочку ДНК.
Оба метода требуют получения достаточного для анализа последовательности количества ДНК. В случае работы с биоптатом трофэктодермы (при проведении ПТГ) речь идет о тонком процессе выделения ДНК из единичных клеток. Для увеличения количества ДНК и возможности безошибочной диагностики применяют метод т.н. «полногеномной амплификации» (WGA), позволяющей в миллионы раз увеличить копии всей ДНК в образце. Трудность в том, что WGA не идентифицирует отдельно источник ДНК, то есть одинаково эффективно будет удваивать и ДНК клеток эмбриона и ДНК, занесенную в реакцию извне.
Поэтому чистота выполнения всех процедур биопсии и подготовки пробы к анализу критична для адекватного ответа генетической лаборатории и проверяется множественными контролями. Например, в нашей лаборатории–партнере всегда проводится контроль чистоты вновь приготовленного «буфера» (среды с ДНК), контроль его функциональной работы, контроль правильного раскапывания буфера в пробирки для анализа, контроль чистоты индивидуально для каждого образца, контроль работоспособности буфера с единичными клетками. Эмбриологи нашей лаборатории, в обязательном порядке, проходят тестовую биопсию, позволяющую минимизировать человеческий фактор ошибок.
После WGA возможно проведение уже самого анализа последовательности полученной ДНК. Все описанные этапы автоматизированы и проходят в специальном приборе под контролем компьютерной программы. На первом этапе создается так называемая библиотека случайных последовательностей ДНК – геном режется на небольшие фрагменты длиной от 25 до 20 000 нуклеотидов, каждый из которых присоединяется к специальным адаптерным участкам с известной последовательностью.
Второй этап — создание копий этих последовательностей при помощи эмульсионной ПЦР (когда в каждой капельке масла в суспензии ферментов амплифицируется индивидуальная молекула ДНК). Третий этап — определение первичной структуры всех фрагментов тем или иным способом. И в заключении, обработка полученных данных, их анализ и интерпретация.
Нажимая кнопку “Отправить заявку”, Вы даете согласие на обработку Ваших персональных данных в соответствии с условиями
Очевидно, что точность определения последовательности ДНК будет зависеть от количества прочтений – ридов (сколько раз один и тот же участок прошел анализ) матрицы – чем их больше – тем точнее. В современных протоколах для ПГТ-А используют сотни тысяч таких ридов, а при анализе единичных мутаций конкретного гена ( ПГТ-М ) – миллионы. За счет этого удается добиться поразительной точности анализа и исключить ошибки неправильного прочтения нуклеотидов.
Заключительным этапом является т.н. биоинформатический анализ полученных данных. Зачастую именно анализ и выявление клинически-значимых отклонений последовательности ДНК и определение критериев их значимости занимает больше времени само определение последовательности. Метод NGS в практике ПГТ дает практически неограниченные возможности; определение хромосомных поломок – лишь незначительная толика того, что может дать этот метод. Достаточно упомянуть о том, что с помощью NGS можно расшифровать весь геном человека!
Выбор правильного подхода и цели исследования определяются на этапе генетического консультирования (желательно до начала процедуры ЭКО!) и может потребовать дополнительных подготовительных исследований ДНК родителей или родственников в случае программ ПГТ при подозрении на наследственное заболевание. Как правило, в большинстве случаев ПГТ достаточно довольно поверхностного анализа генетической информации эмбриона или его родителей.
Преимплантационное генетическое тестирование: переносим здоровые эмбрионы и снижаем риск выкидыша
Как преимплантационное генетическое тестирование сокращает время, необходимое для зачатия и уменьшает число переносов. Об этом в статье врача-репродуктолога Нуриева Наиля Рафаиловича.
Хромосомные нарушения как причина неудачных ЭКО
Желанная беременность, которая не завершилась родами, колоссальный стресс для женщины. Это касается естественной беременности и особенно ЭКО, когда путь к 9 месяцам был долгим и непростым. Неудача снижает мотивацию и многих приводит к отказу от дальнейших попыток. В англоязычной литературе это состояние пациента обозначается термином «dropout» и является предметом статистических исследований. Установлено, что в Великобритании, где предлагалось до 4 бесплатных попыток ЭКО, половина пациенток до 4 попытки не доходила.
Если эмбрион не приживается, то примерно в 9 из 10 случаев причина в эмбрионе, и только в 1 из 10 в организме женщины. Наиболее распространенная причина неудачных переносов эмбриона, выкидышей и неразвивающихся беременностей – анэуплоидия. Это патология, при которой нарушено число хромосом. Каждая клетка эмбриона содержит 46 хромосом. Все что меньше или больше 46 – анеуплоидия. Следовательно, определив число хромосом у эмбриона, мы сможем с большой вероятностью прогнозировать развитие беременности. Это невозможно сделать во время естественной беременности, но доступно всем, кто делает ЭКО.
Что делать если нет здоровых эмбрионов
Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ) – это методика, которая позволяет определить генетические нарушения до переноса эмбриона в матку. Проводят тестирование на 5-6 сутки после оплодотворения. От эмбриона забирают до 5 клеток, после чего эмбрион замораживают. Эмбрионы, у которых выявлены хромосомные нарушения к переносу не рекомендуются. Также до наступления беременности выявляются генетические нарушения, ведущие к синдромам Дауна, Клайнфельтера, Шерешевского-Тернера.
Однако остается вероятность, что по результатам тестирования не будет обнаружено ни одного здорового эмбриона. Получается, что 11 дней мы проводили стимуляцию, еще 5 дней культивировали эмбрион, в течение 3 недель проводили ПГТ, а переноса не будет. Стресс ли это для женщины? Безусловно. Но это не худшее, что могло произойти.
Самый сильный стресс женщина испытывает за 24 часа перед ХГЧ-тестом. Именно в этом случае неудача демотивирует больше всего. Если перенос не сделан по медицинским показаниям, можно еще раз спокойно идти на протокол.
Меньше переносов и меньше выкидышей
Сокращение числа переносов для наступления беременности – это следующий этап развития вспомогательных репродуктивных технологий.
Когда 15 лет назад еще не было технологии витрификации (заморозки) эмбрионов, стимуляция и перенос были неразрывно связаны. Результативность ЭКО оценивалась по количеству беременностей на один перенос. Поэтому репродуктологи стремились переносить по 2 эмбриона.
Затем появилась возможность эмбрионы замораживать с последующим криопереносом. От переноса нескольких эмбрионов постепенно отказались. В качестве критерия эффективности ЭКО появилось понятие кумулятивный процент беременности. Это сумма всех беременностей, полученных на одну женщину на один старт стандартного стимулированного протокола ЭКО с несколькими дополнительными криопереносами. Если у женщины хороший овариальный резерв, то вероятность забеременеть превышает 90%. Идея беременности с первого переноса теряет свою ценность, хотя в нашей клинике этот показатель всегда высок и достигается без многоплодия.
Наконец, с появлением технологии ПГТ мы стремимся получить беременность на меньшее количество переносов. Заведомо нежизнеспособные эмбрионы мы не переносим. Стимуляция и перенос окончательно становятся самостоятельными процедурами. Проводить стимуляцию можно 2 или 3 раза, а перенос сделать всего 1.
Вместе с уменьшением переносов, ПГТ помогает уменьшить частоту выкидышей, поскольку около 75% выкидышей происходят по причине анэуплоидии. Ряд клиник, где проводится ПГТ, уже заявляют, что выкидышем заканчивается только 5% беременностей. Это очень оптимистичная цифра, учитывая, что у женщин младше 35 лет статистика составляет 15%, у женщин в 40 лет – 40%, а у женщин в 45 лет уже до 95%.
Когда ПГТ теряет эффективность
Как и другие методы диагностики ПГТ имеет ограничения. Самое простое ограничение заключается в том, что с возрастом овариальный резерв снижается, а у эмбриологов остается меньше возможностей для выбора. Хорошо выбирать 1 эмбрион из 7. Если эмбрион только 1 – выбора не остается. Женщине придется принимать решения, не руководствуясь данными тестирования.
Второе ограничение в том, что методика зависит от мастерства сотрудника и качества техники, с помощью которой проводится тестирование. Если мастерство и техника недостаточно хорошего уровня есть риск, что во время процедуры эмбрион погибнет. На 5 сутки эмбрион состоит из 128 клеток. Чтобы эмбрион продолжал жить, а исследование принесло результаты, нужно забрать только 5 клеток. Вероятность забрать только 2 или 10 клеток высока. Поэтому инструменты стоят очень дорого, а к процедуре допускается не всякий эмбриолог.
Принимая во внимание эти ограничения, можно утверждать, что ПГТ фундаментально улучшает технологию ЭКО. В каких же случаях показано делать ПГТ?
Кому нужно делать ПГТ
Преимплантационное генетическое тестирование бывает двух видов: ПГТ-А – это исследование на анеуплоидию, о котором мы говорили выше; ПГТ-М – исследование на моногенные генетические заболевания (муковисцидоз и другие).
ПГТ-М показано для пар, которые не обязательно страдают бесплодием, но имеют риск передачи генетических заболеваний потомству. В настоящее время эту процедуру делают существенно реже, чем ПГТ-А. Причина в том, что генетические исследования недостаточно распространены, и большинство просто не владеет информацией о том, какие патологии может передать детям. За ПГТ-М будущее.
ПГТ-А, которому посвящена эта статья, показано всем пациентам, которые идут на ЭКО. Тестирование позволяет значительно сократить время, необходимое для зачатия. Время, которое мы могли потратить на переносы нежизнеспособных эмбрионов, будет потрачено на выявление здоровых и беременность. Можно сравнить процедуру со способами передвижения по городу: пешком, на автобусе или на такси. На такси – дороже, но быстрее. ЭКО с применением ПГТ становится дороже, поскольку процедура требует высококлассного персонала и оборудования в клинике, но результат достигается быстрее.
ПГТ (преимплантационное генетическое тестирование): преимущества, как проходит процедура
Онлайн-консультация
Когда я говорю об этом с пациентами, одна из первых реакций, которую я получаю, заключается в том, что они думают, что это связано со 100-процентной беременностью и идеально здоровым ребенком. Другой миф, который я слышу, заключается в том, что большинство думает, что им это не нужно, потому что у них в семье нет никого с хромосомными проблемами. Оба эти утверждения – мифы. ПГТ – это самое лучшее, что может предложить наука, чтобы дать нам максимальный шанс на здоровую беременность, но у него есть ограничения: он проверяет только хромосомы, а не генетические заболевания, врожденные дефекты или гены аутизма. Большинство моих пациентов, узнав больше об этом, считают целесообразным проведение генетического тестирования перед имплантацией.
Прежде всего. Вы должны знать, что, если у вас есть бластоциста (5-6-дневный эмбрион с сотнями клеток), красивая внешне, это не значит, что она обладает генетической целостностью для здоровой беременности. Было бы хорошо, если бы эмбрионы были точно такими же, как бриллианты, но это не так. Бластоцисты могут быть оценены как бриллианты, но один только внешний вид не говорит о том, что хромосомы в норме. Вы не можете определить это без проведения ПГТ. Если кто-то говорит вам, что ваш эмбрион в порядке внешне, это не обязательно означает, что он имплантируется и разовьется в нормальную беременность. Внешние характеристики не свидетельствуют о нормальных хромосомах. Если человеку тридцать пять лет, то в среднем он получит около пяти бластоцист, и вероятность того, что каждая из них будет иметь нормальные хромосомы (она же эуплоидная бластоциста), составляет 80%. Если вам сорок два года, то среднее количество бластоцист в каждом цикле – одна, а вероятность того, что она будет эуплоидной, составляет 10%.
Я хочу, чтобы вы знали эту информацию сейчас, чтобы у вас был правильный набор ожиданий относительно того, что может произойти в вашем цикле, и вы могли идти в него с широко открытыми глазами. Это не значит, что мы все должны забеременеть в двадцать пять лет, когда у нас самые здоровые яйцеклетки. Нет. Этого не произойдет. Но мы должны знать, как снижается наша фертильность с возрастом. Если вы пытаетесь забеременеть, выясните, какой у вас диагноз по бесплодию. Узнайте, каковы ваши шансы в вашем нынешнем возрасте, и определите, поможет ли вам ПГТ.
Содержание
Что такое ПГТ?
Раньше это называлось ПГС (исследование количества хромосом у эмбрионов, проводящееся при ЭКО перед переносом эмбрионов в матку).
Как проводится преимплантационное генетическое тестирование?
Через три дня после извлечения яйцеклетки мы проводим так называемый вспомогательный хетчинг, чтобы подготовить эмбрионы к биопсии. У меня есть пациенты, которые сомневаются в том, что эмбрионы вылупляются с помощью вспомогательного хетчинга. Я сравниваю это с удалением аппендикса. Это может произойти только через операцию. Точно так же мы можем провести генетический анализ эмбриона, только если сначала вылупим его, а затем с помощью лазера проведем биопсию. При этом вы удаляете несколько клеток из оболочки эмбриона и отправляете их в лабораторию, занимающуюся генетическим тестированием. После биопсии эмбрионы замораживаются, и составляется отчет (так называемый отчет о заморозке), в котором описывается качество каждого эмбриона. Результаты вы получаете от лаборатории, проводящей генетическое тестирование, обычно через неделю.
Кто и когда должен рассматривать возможность получения ПГТ?
Каждый должен рассмотреть этот вопрос. Я хочу, чтобы пациенты были полностью информированы о своих возможностях. Я сажусь со своими пациентами и рассказываю им обо всех способах проведения ЭКО. Я хочу, чтобы они знали о своих возможностях. Есть причины, по которым проведение ПГТ может дать вам больше шансов на беременность. Тем не менее, не все должны это делать. Если ваш эмбрион низкого качества, но достаточно сильный, чтобы наступила здоровая беременность, я прошу своих пациентов пересмотреть вопрос о потенциальном стрессе эмбриона. Не все должны это делать. Если вы не хотите этого делать, тоже ничего страшного.
Но есть моменты, когда стоит подумать об этом точно:
Существуют ли какие-либо риски при проведении ПГТ?
Да! Я только что упомянула об этом выше. Мы хотим быть уверены, что тестирование эмбрионов не повредит им.
Каковы преимущества ПГТ?
Почему я должен рассмотреть возможность проведения ПГТ?
Вот возможные причины, которые я советую вам обсудить с вашим врачом:
Мои советы профессионала:
В заключение
Это все, что я хотела бы знать, если бы была пациентом, рассматривающим возможность проведения ПГТ. Спасибо, что прочитали это. Я надеюсь, что все, что вы делаете, работая над достижением своей цели, будет успешным. Я посылаю вам всю свою положительную энергию.