Что является результатом биотестирования
Процедура биотестирования: суть, задачи и методы
В современную индустриальную эпоху промышленные предприятия и заводы активно загрязняют биосферу различными видами производственных отходов. После очистки территории от продуктов человеческой деятельности проводятся различные процедуры, которые определяют степень загрязненности среды.
Биотестирование представляет собой процедуру, которая направлена на определение фактического экологического состояние окружающей среды в определенный момент времени.
Зачем проводятся биотестирование и биоиндикация?
Суть процедур биотестирования и биоиндикации заключается в определении эколого-биологического состояния окружающей среды посредством применения разных методов.
Следует отметить, что биоиндикация основана на непосредственном наблюдении за численностью и составом биоты (флоры и фауны) определенной местности. В данном методе оценки состояния качества окружающей среды ключевую роль играет термин: биоиндикатор. Биоиндикатором может быть вид или группа видов существ, по морфофункциональным характеристикам которых судят о экологическом состоянии о качестве состояния того или иного участка биосферы. Обычно используются классические для определенных участков биосферы биоиндикаторы:
Процедура биотестирования основана же на определении степени токсической загрязненности среды при помощи использования специальных тест-объектов.
Тест-объекты
Тест-объектами называются определенные представители животного мира, отражающие условную степень токсической загрязненности участка территории, на котором они находятся. Такими тест-объектами могут быть следующие представители живой природы:
некоторые виды и рода водорослей;
эритроциты рыб и мышей;
Следует отметить, что данные тест-объекты помещаются в специальные условия лабораторной среды (соответствующие экологическому состоянию исследуемой местности) и подробно исследуются лабораторными методами, на основании результатов которых делается заключение о токсикологической загрязненности определенного биогеоценоза.
Отдельно обозначим, что в данном контексте понятие биогеоценоз используется как совокупность живых организмов на определенном участке территории, обладающих замкнутым обменом веществ.
Используемые методы
В основе биотестирования и биоиндикации лежат лабораторные методы исследования:
иммунологические и физиологические.
Существенной разницей между методами проведения лабораторной диагностики тест-объектов при реализации данных процедур является то, что при биоиндикации биологический организм, взятый с участка исследуемой среды, помещается в лабораторные условия, в которых определяется его морфофункциональное состояние, а при биотестировании тест-объект, не связанный с территорией, на которой проводится экспертиза, в рамках лабораторной диагностики помещается в условиях, которые соответствуют таковым в изучаемом биогеоценозе. Данный нюанс проводит разделительную черту между двумя схожими по своей структуре процедурами.
Биоиндикация воздуха
Метод биоиндикации в рамках определения экологического состояния воздуха на определенной биогеохимической провинции заключается в использовании измерительных палеток. Палетки представляют собой полимерные материалы, которые разделенные линия для удобства подсчета численности популяции лишайников. В зависимости от количества лишайников в популяции определяется экологическое качество состояния воздуха на изучаемом участке территории.
Биотестирование водоемов
Биотестирование водоемов проводится при использовании двух основных методов: генетического с использованием лабораторной диагностики фитопланктона и метод, суть которого заключается в биотестировании фитотоксичности по показателям при проращивании семян в исследуемой воде.
Генетический метод основывается на исследовании рибонуклеиновых кислот фитопланктона. По возникающим в них мутациям и изменениям определяют степень токсичности и загрязненности изучаемого водоема.
Биотестирование фитотоксичности основывается на динамических показателях прорастания семян растений в изучаемой воде. При реализации данного метода учитывается время прорастания семян при орошении водой, взятой из изучаемого водоема.
Биооценка токсичности сточных вод
Процедура биоиндикации также применяется в качестве биологической оценки токсичности сточных вод. В качестве тест-объектов изучаются различные ресурсы (поверхностные и донные) сточных вод. Наиболее часто используемыми биоиндикаторами являются различные микроводорослевые культуры. Также анализ токсической загрязненности сточных вод может быть произведен посредством применения, описанного раннее метода динамики проращивания семян при орошении их сточной водой.
Биотестирование морской среды
Оценивание токсикологической загрязненности морской среды проводится с использованием в виде индикаторов личинок атеринов. Анализ экологической загрязненности морских вод проводится по следующему алгоритму:
Личинки помещаются в среду, лишенную каких-то либо токсикантов.
Реализуется метод микрокалометрии (основанный на способности продуцировать тепло живыми организмами).
Проводится измерение колебаний концентрации в среде ксенобиотических агентов (чужеродных).
На основе полученных данных и сравнении с контрольными образцами выдается заключение о степени загрязненности изучаемой территории.
Биотестирование отходов 5 класса
К отходам класса опасности относятся бытовые отходы, утилизируемые на общих свалках. В качестве примеров отходов данного класса опасности можно привести следующие: опилки, бумага, упаковка из под кирпича, яичная скорлупа, зола, щебень, различный металлолом, древесные материалы и так далее.
В законодательстве Российской Федерации существует пункт, согласно которому производственные отходы должны быть отнесены к тому или иному классу опасности. За несоблюдение данного пункта владельцам промышленных предприятий (юридическим лицам) полагается достаточно большой штраф (порядка 200-300 тысяч рублей в зависимости от региона).
Биотестирование отходов – это процедура, при которой проводится определение изучаемых отходов к тому или иному классу опасности. Биотестированием могут заниматься только организации, имеющие на это лицензию.
Экологическое состояние окружающей среды – это важный показатель, который определяется плодородием почвы, степень загрязненности воздуха и водоемов, численностью и морфофункциональным состоянием флоры и фауны изучаемого участка территории. Данный показатель определяется при помощи применения процедур биотестирования и биоиндикации. Кроме того, указанные процедуры нашли широкое применение в оценке классов опасности отходов, что также направлено контроль загрязненности окружающей территории.
Процедура и методы биотестирования, порядок проведения, протокол
Предприятия промышленности производят большое количество отходов и загрязняют окружающую среду. Провести классификацию отработанных материалов, сырья и проверку состояния среды после мероприятий очистки помогут методы биотестирования и биоиндикации. Этим направлением занимаются ученые в рамках эксперимента. Исследователи от науки разрабатывают новые методики, из которых, однако, законодательно утверждены лишь некоторые. Сама процедура проводится в установленном порядке лабораториями биохимического анализа.
Суть и задачи биотестирования и биоиндикации
И биоиндикация, и биотестирование активно применяются в сфере контроля за состоянием окружающей среды. Некоторые методы регламентируются нормативными актами в рамках экологического законодательства.
Но в значении этих двух процедур биодиагностики существуют различия. Биотестирование заключается в установлении уровня токсичности среды через специальные тест-объекты. Это простой и точный метод, который получил распространение вместе с методами химанализа. Есть 2 основных типа биотестирования – хемотаксическое и морфофизиологическое. Первый — более точный, позволяет анализировать продукты жизнедеятельности тест-объектов. Второй вид описывает изменения физиологии организмов в загрязненной среде, например, мутаций и врожденных аномалий — тератогенез.
Биоиндикация, в свою очередь, дает оценку среды по численности и составу видов-индикаторов. Пример – мониторинг состояния воздуха конкретной территории с помощью анализа биоты лишайников.
В этом направлении работают ученые, публикуя результаты в научных изданиях – «Гидрометеоиздат», «Молодой ученный» и др. Более масштабные исследования описываются в монографиях, диссертациях.
Тест-объекты для биотестирования и биоиндикации
Специальные живые тест-объекты – ключевое средство оценки загрязнения среды. Это своеобразные датчики, «лакмусовые бумажки», улавливающие информацию об уровне загрязнения. Благодаря им биотестирование успешно заменяет сложные химические анализы. В зависимости от цели исследования, выбирают объекты с чувствительностью на определенный фактор. По их поведению и другим изменениям судят о превышении ПДК (предел допустимой концентрации) того или иного загрязняющего агента в среде.
В частности, важны анатомические и физиологические характеристики тест-объектов. Этим обусловлено использование в биотестировании тератогенеза, изучения уродств и патологий развития организма вследствие влияния определенных внешних факторов.
Здесь стоит разграничить понятия. Так, для биотестирования используются именно тест-объекты – генетически однородные лабораторные культуры микроорганизмов и некоторых гидробионтов:
Стандартные методики биотестирования отличаются в разных странах. Так, в Украине нормативными документами предусмотрены в качестве тест-объектов ракообразные (жаброногие и вествистоусые), фотогенные бактерии, инфузории и водоросли.
Биоиндикация обращается к анализу численности и других параметров видов, обитающих в естественных условиях – биоиндикаторов. Обычно это растительные объекты или симбионты:
В этом случае также может учитываются влияние на конкретный организм, его структурные и морфологические изменения.
Методы биотестирования
Методы биотестирования заключены в следующем: организмы, адаптированные к условиям лаборатории, помещаются на время опыта в исследуемую среду. Это дает интегральную картину экологической обстановки. Результаты экстраполируются на качество жизни людей, биоразнообразие экосистем. Обычно анализу подвергается комплекс видов, для каждого из которых применяется система методов: биохимические (например, оценка окислительных процессов в организме, фотосинтеза), морфологические (видимые изменения фенотипа), физиологические (интенсивность обмена энергии) и иммунологические (устойчивость к инфекциям). Различаются исследовательские и установленные регламентом методики. Биотестирование почв, воды и воздуха обычно проводится в техногенных зонах города или агросистемах сельской местности.
Биоиндикация воздуха
Воздух атмосферы проверяют на экологическую чистоту с помощью методов биоиндикации. Оценка степени воздушного загрязнения по состоянию лишайников проводится палетами, сделанными из полимерного гнущегося и прозрачного материала.
Биотестирование водоемов
Биологическая оценка загрязнения природных водоемов заключается в характеристике степени выживаемости гидробионтов в загрязненной среде (сапробность).
В водоеме отбираются пробы планктона, затем проводится генетический анализ рибосомальной РНК организмов. Еще один метод оценки качества воды – биотест фитотоксичности по проращиванию семян растений. Его смысл – в исследовании влияния воды из водоема через полив на агроэкосистемы (например, приусадебные участки). Обычно оцениваются такие показатели, как скорость прорастания семян, всхожесть при поливе почвы исследуемой водой.
Кроме планктона в пробах воды, анализируются и организмы, среда обитания которых – донные отложения. Водную вытяжку этого материала тестируют по коэффициенту прироста водорослей.
Но чаще всего биотестирование пресной воды в природных и искусственных водоемах проводится по анализу выживаемости дафний (Daphnia magna Straus) в соответствии с ГОСТ Р 56236-2014.
Биологическая оценка токсичности сточных вод
Несмотря на инновационные технологии очистки, необходима последующая процедура биоиндикации. Уровень токсикологического воздействия сточных вод оценивается с помощью тест-объектов различного рода. Так, при оценке токсичности почв используются равноресничные инфузории, а для определения воздействия сточных вод на морскую и озерную среду – микроводорослевые культуры Platymonas viridis Rouch, Dunaliella salina Teod. Эксперимент при этом проводят долгосрочный – в течение 15 дней. Анализ влияния стоков также может проводиться и с помощью описанного агроэкологического метода – биотеста на проращивании семян. Анализируются как поверхностные, так и подземные водные ресурсы, загрязненные отработанными нефтепродуктами, тяжелыми металлами и другими токсическими агентами.
Биотестирование морской среды
Биотестирование отходов 5 класса
Процедуру биотестирования отходов 5 класса проводят для определения токсичности мусора посредством тестовых объектов.
Анализируется наличие и степень трансформации ряда характеристик организмов.
Диагностику проводят с дафниями, цериодафниями, бактериальными культурами и протозоями. При этом речь не идет об опасных медицинских, радио- и биоотходах.
Какие отходы относят к 5 классу опасности
К пятому классу относятся:
Производители отходов 5-го класса опасности, выступающие малыми или средними предпринимателями, должны каждый год отчитываться по отходам МПС.
Кому и зачем нужна процедура биотестирования
Провести биологическую экспертизу отходов имеет право только лабораторная организация с соответствующей аккредитацией.
Квалификация специалистов должна быть подтверждена аттестационными свидетельствами. Методики – соответствовать Федеральному закону от 26.06.2008 года N 102-ФЗ «Об обеспечении единства измерений».
Порядок проведения
Биотестирование отходов 5-го класса проводится в следующем порядке:
Водная вытяжка – измельченный материал проб грунта, растительных остатков или органики (ил и донные отложения), смешанный путем взбалтывания с определенным количеством дистиллированной воды.
Для пополнения федерального классификационного каталога отходов (ФККО), нужно заполнить заявку на сайте https://gko.fsrpn.ru/ и в форме бумажного документа передать в соответствующий орган. Процесс затянется на 3 месяца, затем название отхода будет включено в каталог. Протоколируемое биотестирование можно проводить только для отходов из ФККО.
Стоимость и продолжительность процедуры
Цена за процедуру биотестирования отходов 5 класса зависит от количества отходов. Так, предложение лаборатории «ЭКО консалт» в Севастополе – 30 000 р. Это не такая большая цена, если учесть размер санкций за неисполнение обязательств отнесения отходов производства к определенному классу, для подтверждения этого отнесения или составления паспортов отходов 1-4-го классов:
Поэтому лучше заранее заказать процедуру биотестирования и избежать более крупных убытков и ущерба репутации предприятия. Важно удостовериться, что выбранная лаборатория имеет аккредитацию.
Биотестирование и биоиндикация позволяет отнести отходы предприятия к определенному классу. Процедура достаточно дорогая, но получение протокола во многих случаях обязательно. Биотестирование – простой метод оценки качества окружающей среды, дающий точные результаты. Существуют методики, регламентированные нормативными документами, и экспериментальные. В качестве тест-объектов используют чувствительные к определенному фактору (кислотно-щелочной баланс, концентрация тяжелых металлов) организмы – водоросли, рачки, простейшие. Иногда применяют растения и их семена.
результат биотестирования
3.15 результат биотестирования: Конечный вывод о токсичности водной среды, установленный в ходе биотестирования.
3.19 результат биотестирования: Конечный вывод о токсичности водной среды, установленный в ходе биотестирования.
3.1.24 результат биотестирования: Конечный вывод о токсичности водной среды, установленной при биотестировании.
3.18 результат биотестирования: Конечный вывод о токсичности водной среды, установленный в ходе биотестирования.
3.15 результат биотестирования: Конечный вывод о токсичности водной среды, установленный в ходе биотестирования.
3.1.30 результат биотестирования: Конечный вывод о токсичности водной среды, установленный при биотестировании.
Полезное
Смотреть что такое «результат биотестирования» в других словарях:
Р 52.24.690-2006: Оценка токсического загрязнения вод водотоков и водоемов различной солености и зон смешения речных и морских вод методами биотестирования — Терминология Р 52.24.690 2006: Оценка токсического загрязнения вод водотоков и водоемов различной солености и зон смешения речных и морских вод методами биотестирования: 3.1 анализ проб воды: Определение физических, физико химических, химических … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
РД 52.24.669-2005: Унифицированные методы биотестирования для обнаружения токсического загрязнения поверхностных вод суши с использованием микрозоопланктона — Терминология РД 52.24.669 2005: Унифицированные методы биотестирования для обнаружения токсического загрязнения поверхностных вод суши с использованием микрозоопланктона: 3.32 LC50: Концентрация токсиканта, приводящая к гибели 50 % взятой для… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
Р 52.24.741-2010: Оценка токсичности поверхностных вод суши в условиях чрезвычайных ситуаций методом экспрессного биотестирования — Терминология Р 52.24.741 2010: Оценка токсичности поверхностных вод суши в условиях чрезвычайных ситуаций методом экспрессного биотестирования: 3.26 LC50 : Концентрация токсиканта, приводящая к гибели 50 % взятой для эксперимента выборки.… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
диапазон — 3.9 диапазон (range): Диапазон между пределами, выраженными заявленными значениями нижнего и верхнего пределов. Примечание Термин «диапазон», как правило, используют в различных модификациях. Он может представлять собой различные характеристики,… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
Р 52.24.695-2007: Оценка токсического загрязнения природных вод и донных отложений водных экосистем по коэффициенту регенерации популяции — Терминология Р 52.24.695 2007: Оценка токсического загрязнения природных вод и донных отложений водных экосистем по коэффициенту регенерации популяции: 3.1 анализ проб воды: Определение физических, физико химических, химических, биологических,… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
диапазон реагирования — 3.5 диапазон реагирования: Интервал значений концентраций эталонного токсиканта, в пределах которого результат биотестирования является надежным. Источник … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
Р 52.24.763-2012: Оценка состояния пресноводных экосистем по комплексу химико-биологических показателей — Терминология Р 52.24.763 2012: Оценка состояния пресноводных экосистем по комплексу химико биологических показателей: 3.1.2 биологические показатели: Гидробиологические, микробиологические показатели и показатели, полученные при биотестировании.… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
Р 52.24.756-2011: Критерии оценки опасности токсического загрязнения поверхностных вод суши при чрезвычайных ситуациях (в случаях загрязнения) — Терминология Р 52.24.756 2011: Критерии оценки опасности токсического загрязнения поверхностных вод суши при чрезвычайных ситуациях (в случаях загрязнения): 3.1.1 аварийная ситуация на водном объекте: Ситуация, сложившаяся на водном объекте или… … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
Метрологическая — исп Состояние ТССНХ, оп с Источник: МИ 2021 89: Рекомендация. ГСИ. Метрологическое обеспечение гибких производственных систем. Основные положения … Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации
Что является результатом биотестирования
Наиболее эффективным как в российской, так и мировой природоохранной практике считается использование нескольких тест-организмов для установления токсичности [5; 16].
При несомненных достоинствах биотестирования исследователи сталкиваются с рядом трудностей в процессе объяснения получаемых результатов. Изложение опыта работы с результатами биотестирования стало целью данной статьи.
Материал и методы исследования
Объектами наших многолетних исследований являются компоненты окружающей среды как относительно благополучных фоновых территорий, так и районов, подверженных техногенному прессу. Кроме того, проводятся эксперименты по моделированию действия приоритетных загрязняющих веществ на тест-организмы различной систематической принадлежности.
Интегральная токсичность водных сред (природных вод, вытяжек из почв, донных отложений) определяется по методикам биотестирования, допущенным для целей государственного экологического контроля и мониторинга и внесенным в федеральный реестр методик РФ [9, 11-13]. Разрабатываются и апробируются авторские методы.
Результаты исследования и их обсуждение
На результаты биотестирования, кроме загрязняющих веществ, присутствующих в пробе, влияет естественная «матрица» водной среды. Матрицей природной воды мы называем здесь весь комплекс веществ, включенных в поверхностные или подземные воды естественным образом и активно формирующих химические, физико-химические и токсикологические свойства вод [6]. Аспекты проблемы:
1) при оценке интегральной токсичности вод нередко «матрица» природной воды, которая принимает загрязнение, маскирует вредные вещества (например, за счет комплексообразования);
2) «матрица» как среда для культивирования тест-организмов, обладая региональными и локальными особенностями, влияет на общее состояние биообъектов, их чувствительность и устойчивость к различным соединениям;
3) кроме того, при реализации многих методик биотестирования культивационная вода используется для приготовления серий разбавлений тестируемой среды, влияя на итоговый результат.
Проблема отчасти решается приемами стандартизации тест-объектов, в том числе поддержанием чувствительности к модельному токсиканту в установленном диапазоне, что предполагается всеми аттестованными методиками.
Следующая проблема свойственна для методик, в которых в качестве тест-функции выступает гибель организма. Наиболее известными нормативными документами, ориентирующимися на этот показатель, можно назвать методики с использованием низших ракообразных [11, 12]. Дело в том, что до проявления крайней степени токсического эффекта, т.е. гибели, можно наблюдать и использовать для оценки качества тестируемой среды массу показателей. Такие эффекты, как изменение двигательной, пищевой активности, скорости размножения, и другие реакции хорошо идентифицируются, особенно в экспериментах по установлению хронического токсического действия [14]. Однако существующие аттестованные методики этого не предусматривают, вероятно, в силу усложнения процедуры обработки результатов. Например, классический биотест с использованием D. magna в части определения хронических воздействий предполагает подсчет количества абортивных яиц, но при обработке результатов эти данные не используются. В научных работах учет абортивных яиц обсуждается достаточно давно [1].
Для учета количества абортивных яиц предлагаем усовершенствование алгоритма аттестованной методики путем введения дополнительного критерия хронической токсичности: если количество абортивных яиц превысило 10% от числа молоди за период эксперимента, то пробу следует признать оказывающей хроническое токсическое действие.
Критерий апробирован. Например, при исследовании водоемов г. Кирова резкого снижения плодовитости D. magna не наблюдалось, но в ряде проб отмечено появление абортивных яиц, что считается крайне негативным явлением (табл. 1).
Таблица 1
Использование абортивных яиц как критерия хронической токсичности (тест-объект Daphnia magna)
Плодовитость на 1 самку
Количество абортивных яиц
(их доля от общего числа молоди)
Заключение о токсичности пробы по аттестованной методике